生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用价值研究报告

化学发光法是一种通过化学作用发出的光的强弱来判断一种物质的成分的一种分析方法。化学发光免疫分析是将化学发光体系和免疫反应有机地融合在一起，利用与化学发光有关的物质对抗体或抗原进行标记，与被测的抗原或抗体发生作用后，通过对自由状态下的化学发光标记物进行分离，再加入到该体系中的其他有关物中，从而发生化学发光，从而实现对抗原或抗体的定量或定性检测。

4种常用的标志物分别是：鲁米诺，异鲁米诺及其衍生体，吖噬酷衍生物，过氧化物酶和碱性磷酸酶。近年来，化学发光免疫检测技术因其高灵敏度、高特异性、适用范围广、所需仪器简单、线性范围广等优势，已经被越来越多的人关注，且该项技术在生命科学、临床医学、环境、食品和医药等领域具有广阔的应用前景。在进行免疫分析的过程中，能够涉及的免疫反应最重要的就是与抗原和抗体之间的相互作用。由于生物分子体积大，扩散速度慢，并且受到传质率及反应速度的影响，常规的检测技术往往要花上几个小时来进行，极大地制约了检测的通量及适用范围。为了减少免疫测定的耗时，研究者们已经提出了各种方法，以期更好的提升传质速度及反应动力学来实现免疫检测，进而扩大化学发光免疫的应用范围。在许多实际问题中，往往需要对一个多组分的复合系统进行分析。例如，在肿瘤的临床诊断中，因为肿瘤标记物特异性不够，通常会选取若干个肿瘤标记物组，用联用方法来增强肿瘤的诊断特异性；另外，在对天然水体中农药和除草剂进行浓度检测的过程中，也常常要对其进行同步检测。

以从综合的角度对其污染的状况进行测定，在对多个组分进行同时检测时，往往需要对多个单组进行分析，这样不仅耗时长，而且需要消耗大量的试剂和大量的工作量。多组分同步或连续测定因其高通量、短时间、少样品消耗和低廉的分析费用而受到广泛关注。在目前所报道的多种化学发光检测新技术中，有些是利用微流控技术和电感耦合器件（CCD）技术，实现了多种成分同时检测；有些则是借助固相载体的特点，可以更好的对其进行分辨，进而达到检测的目的。从另外的角度来看，由于许多实际问题的解决，往往要求对较少含量的待测物质进行快速、准确的测定，因此，发展高灵敏度的化学发光免疫分析技术成为当前研究的热点。因此，抑制噪声、加强检测信号是提升检测灵敏度的重要手段。降噪方面，采用了一种新型的蛋白质来密封生物功能性界面，避免了对外界环境的干扰。针对该问题，本项目拟开展基于荧光标记技术的多模态免疫检测方法研究。近年来，金纳米粒子，碳纳米管，碳纳米角，氧化硅等纳米粒子，量子点及其与其复合的纳米结构，被用来构筑超高灵敏度的免疫传感，并在生物标志物检测方面有了新的突破。其中，部分纳米颗粒既能充当酶的仿生催化剂，又能装载多个酶类，将其用于高灵敏度的化学发光检测，推动了该领域的迅速发展。虽然化学发光免疫技术已经被用于临床，但它的早期主要作用是示踪信号，没有很强的荧光和敏感性，因此并没有得到很好的应用。随后发展出的化学发光免疫分析技术，由于其信号更强，且能有效地提高了荧光的亮度，使得其在临床上得到了更多的使用，尤其是在甲状腺癌的诊断中，其在临床上的应用效果也更加显著。此外，将化学发光成像技术与免疫分析技术相结合，实现对免疫分析的选择性、灵敏度、速度及通量的提升。因此，发展小型化、集成化、自动化的CE检测技术是当前研究热点。在此基础上，进一步发展高选择性、高稳定性、高荧光动力学曲线与免疫分析相匹配的高灵敏度、高选择性的荧光探针，并将其应用于临床，发展可增强荧光信号的特异性标记技术，构建基于荧光探针的化学发光免疫分析新技术，为其应用奠定基础。